Durchflussbasierte multi-Lichtschicht-Fluoreszenz-Mikroskopie für biologische Proben

Die Lichtschichtfluoreszenzmikroskopie ist eine leistungsstarke Methode zur 3D-Charakterisierung fluoreszierender Proben. Neben dem piezo-gesteuerten schrittweisen Scannen der Probe durch die Lichtschicht ist auch die durchflussbasierte Bewegung der Probe unter 45° zur Lichtschicht denkbar. Dabei können mehrere Lichtschichten gleicher Intensität genutzt werden, um eine Bildgebung gleichzeitig in mehreren Ebenen zu realisieren. Dieser Ansatz kann zur Erhöhung der Scangeschwindigkeit oder zur Geschwindigkeitsmessung herangezogen werden. Wir zeigen das Design, die mikrotechnische Herstellung und die Charakterisierung eines vierstufigen diffraktiven optischen Elements (DOE), das in Kombination mit einer refraktiven Zylinderlinse fünf Lichtschichten gleicher Intensität entlang eines um 45° zur optischen Achse gekippten Schlauches erzeugt. Das System basiert auf dem Ansatz der Detour-Phase und kombiniert die Funktionalitäten einer multifokalen diffraktiven Linse und einem linearen Gitter zur Strahlteilung. Wir zeigen durch erste Messungen an fluoreszierenden Mikrokugeln, die in einem Schlauch durch die Lichtschichten bewegt werden, die Funktionalität des DOEs.